本文標(biāo)題："生物百科-切片上棕色太深或者整個(gè)切片都呈現(xiàn)棕的原因"
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切片上棕色太深或者整個(gè)切片都呈現(xiàn)棕色
初級(jí)抗體濃度可能過高, 建議將濃度減少2 - 3倍。
載片在DAB溶液中的停留時(shí)間過長(zhǎng), 請(qǐng)縮短孵育時(shí)間。
組織受到不適當(dāng)?shù)淖钄唷Ｕ?qǐng)?jiān)黾幼钄嘌?blocking serum)的孵育時(shí)間, 或者將它的濃度增加3倍。若使用BSA, 確定不含脂肪酸。
組織受到不適當(dāng)?shù)淖钄唷Ｕ?qǐng)?jiān)黾幼钄嘌?blocking serum)的孵育時(shí)間, 或者將它的濃度增加3倍。若使用BSA, 確定不含脂肪酸。
兩次抗體孵育間的清洗步驟被縮短或者忽略。
使用雙氧水(H2O2)進(jìn)行預(yù)孵育時(shí), 沒有使用阻斷溶液。
H2O2過期, 應(yīng)使用新試劑。
可能有發(fā)生次級(jí)抗體和組織蛋白質(zhì)間的交互反應(yīng)現(xiàn)象, 請(qǐng)加入下列二者或其中之一:
將1%的正常兔血清(Calbiochem目錄編號(hào)NS01L) 加入阻斷溶液中。
將0.01% TRITON® X-100 (Calbiochem目錄編號(hào)648462)加入初級(jí)抗體溶液中(注意: 這種作法也有可能減少一些抗體的專一鍵結(jié))。
問題: 載片上發(fā)現(xiàn)碎片
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